Stage Master

Les récepteurs nucléaires (RNs) représentent une famille de facteurs de transcription ligand-dépendants possédant un domaine de liaison à l’ADN (DBD) bien conservé et un domaine de liaison au ligand (LBD). Plusieurs RNs ont une fonction cruciale dans le métabolisme et ont des effets anti-inflammatoires et régulateurs de l’immunité, et en particulier le récepteur des glucocorticoïdes (GR). Le but du projet est l’analyse au niveau moléculaire, par une approche de biologie structurale intégrative, des mécanismes de régulation de la transcription par GR. Le stage se focalisera sur la production et l’isolation de GR recombinant, sous forme native, complète ou tronquée au niveau des différents domaines. D’autre part, des complexes de transcription endogènes basés sur GR seront isolés à partir de cellules eucaryotes. Après analyse par spectrométrie de masse, les complexes seront caractérisés en solution en utilisant diverses techniques biophysiques, telles que l’ultracentrifugation analytique et la diffusion de lumière. Des études de cryo-microscopie électronique (cryo-EM) seront entreprises permettant la reconstruction tridimensionnelle des complexes et l’analyse de leur topologie globale en parallèle à des études de cristallisation et cristallographie. Le projet permettra d’obtenir des informations originales sur l’architecture des homodimères de GR et sur les mécanismes moléculaires du cross-talk entre GR and ses partenaires physiologiques grâce à une combinaison de méthodes structurales et biophysiques.